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詳解超大尺寸制備色譜柱的操作使用步驟

  近年來,隨著研究領(lǐng)域的不斷拓寬和分析需求的增加,傳統(tǒng)尺寸的制備色譜柱已經(jīng)難以滿足分析要求,因此超大尺寸制備色譜柱逐漸成為研究熱點。由于其內(nèi)部直徑較大,固定相顆粒的尺寸和負荷也相應(yīng)增大,從而提高了柱的分離效率。其次,由于床高的增加,樣品量也相應(yīng)增加,因此可以處理更多樣品,提高分析吞吐量。此外,還具有較高的適用范圍,可以應(yīng)用于不同領(lǐng)域的研究,如化學、生物、環(huán)境等。

  超大尺寸制備色譜柱的操作使用步驟:

  1.將待分離的大分子或復雜混合物溶解或懸浮在適當?shù)娜軇┲,并將其過濾以除去雜質(zhì)。

  2.根據(jù)實驗要求,選擇合適的流動相,并進行必要的pH調(diào)節(jié)或添加緩沖劑。

  3.將填料填充到色譜柱中,通常需要使用專用裝填設(shè)備,確保填充均勻而緊密。

  4.使用洗脫劑將色譜柱進行預洗,以去除非特異性吸附的雜質(zhì)。

  5.將樣品加載到色譜柱中,可以通過重力流動或壓力推動方式進行。

  6.根據(jù)實驗要求和柱子尺寸,收集和回收純化的目標產(chǎn)物。

  7.使用洗脫劑進行柱子洗脫,將非特異性吸附的雜質(zhì)從色譜柱中洗脫。

  8.通過檢測設(shè)備(如HPLC、UV-Vis等)對純化的目標產(chǎn)物進行質(zhì)量評價。

  9.對色譜柱進行適當?shù)那逑春捅4妫詡湎麓问褂谩?/p>

  超大尺寸制備色譜柱的維護保養(yǎng)方法:

  1.定期使用適當?shù)南疵搫┻M行色譜柱清洗,以去除殘留樣品和其他雜質(zhì)。

  2.在不使用的時候,將色譜柱逆置存放,并用適當?shù)姆忸^密封以防止灰塵和濕氣污染。

  3.在使用過程中,避免超過色譜柱的承受壓力,以防止柱子爆裂。

  4.定期檢測色譜柱的性能和效果,如分離效果和回收率等,并根據(jù)需要采取相應(yīng)措施修復或更換色譜柱。

  5.在操作過程中,注意安全操作,遵守實驗室安全規(guī)范,避免產(chǎn)生危險或污染。

  6.定期維護色譜柱,例如更換填料或清洗固定相,確保色譜柱的長期穩(wěn)定性和性能。

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